果莢發(fā)育突變體S12的大尺度定位

1.75萬字 42頁 原創(chuàng)作品，已通過查重系統(tǒng)

摘 要
擬南芥是十字花科植物是研究有花植物的遺傳、細胞、發(fā)育、分子生物學研究的模式植物。果莢是植物生殖與種子發(fā)育的重要器官，涉及植物發(fā)育最為重要的生物學過程。擬南芥很容易進行人工誘變產生大量突變體所以我們利用擬南芥作為實驗材料但是此類突變體分析必須利用圖位克隆才能確定突變體基因。
同線性測定是指測定目標基因所屬的染色體。我們利用EMS誘變擬南芥Ler生態(tài)型，在M2中分離出果莢發(fā)育突變體S12。通過突變體與Col生態(tài)型進行雜交利用F2代分離的突變體進行基因定位，其中同線性測定是精細定位的第一步。通過F2代突變體混合DNA樣品分析初步確定該突變體和NGA63連鎖，但是需要進行單株基因型檢測進行確認。我們擬用NGA63對F2分離的突變體單株進行基因型檢測，判斷該突變體與NGA63連鎖是真實的。
隨后我們又選擇了A8103和A3925兩個分子標記，在F2群體進行單株基因型檢測發(fā)現(xiàn)S12突變體與三種分子標記NGA63，A8103，A3925之間的交換率分別0%3.7%，0%。NGA63與A8103，NGA63與A3925以及A8103與A3925之間的物理距離分別為40cM3cM35cM，而實際檢測的交換率分別為6.25%，0%，6.25%。從結果發(fā)現(xiàn)實際檢測的交換率比理論值有所降低。由此可推斷，可能是檢測群體太?。画h(huán)境因素，沒有在最適條件下進行實驗，如溫度過高或過低；突變體本身的原因，如突變頻率等原因造成的。此結果，會影響我們對S12突變體的定位，至于交換率為什么會降低，還有待進一步研究。


關鍵詞：擬南芥；圖位克隆；分子標記；果莢發(fā)育