超聲對(duì)玉米蛋白酶解物抗氧化性的影響及抗氧化肽庫的構(gòu)建

1.4萬字 33頁 原創(chuàng)作品，已通過查重系統(tǒng)

摘 要
超聲波是頻率高于20 kHz，不引起聽覺的彈性波。超聲波作用可使蛋白質(zhì)降解，或者改變蛋白質(zhì)構(gòu)象，促使其親水基團(tuán)更多的暴露出來，提高蛋白質(zhì)在水中的溶解度，有利于酶和蛋白質(zhì)底物結(jié)合，最終提高酶解效率。目前國(guó)內(nèi)外采用超聲預(yù)處理蛋白原料，提高其酶解效率的報(bào)道較少。本實(shí)驗(yàn)旨在研究超聲對(duì)玉米蛋白酶解物抗氧化性的影響，同時(shí)創(chuàng)建了抗氧化肽庫，為玉米蛋白的進(jìn)一步開發(fā)利用提供研究基礎(chǔ)。通過對(duì)玉米蛋白酶解物的水解度、DPPH清除率、OH清除率、鐵離子螯合力、氨基酸組成以及超聲空化效應(yīng)等的測(cè)定與研究，確定聚默聲、掃頻超聲、定頻超聲等不同超聲預(yù)處理方法對(duì)玉米蛋白酶解物抗氧化性的影響。
（1）不同超聲預(yù)處理都能使玉米蛋白酶解物水解度增強(qiáng)，其中聚默聲的效果最好，實(shí)驗(yàn)得到的最高水解度為9.17%，比對(duì)照組增長(zhǎng)了30.76%。不同超聲預(yù)處理的玉米蛋白酶解物進(jìn)行氨基酸組成分析，可以發(fā)現(xiàn)所以超聲處理組比對(duì)照組擁有更多的蛋氨酸，此外，掃頻超聲和定頻超聲（47.8% 和47.6%）下的總疏水性氨基酸含量比聚默聲和對(duì)照組的高（46.3% 和 45.8%）。
（2）經(jīng)掃頻超聲和定頻超聲預(yù)處理的玉米蛋白酶解物的DPPH自由基清除活性分別為 58.39% 和57.83%，比對(duì)照組的高，而聚默聲的清除率較低。三種超聲預(yù)處理對(duì)玉米蛋白酶解物的羥基清除率都有有效增加，在5mg/mL的最高濃度，聚默聲，掃頻超聲，定頻超聲和對(duì)照組的羥基清除率分別為60.77%， 62.44% ，67.43% 和 65.34%(p < 0.05)。三種超聲預(yù)處理對(duì)玉米蛋白酶解物的鐵離子螯合力有所增強(qiáng)，其中經(jīng)定頻超聲預(yù)處理的玉米蛋白酶解物在 0.25mg/mL濃度表現(xiàn)出最高的螯合活性 (75.18%) ，相比對(duì)照組增長(zhǎng)了 7.07%（p <0.05）。
（3）通過Wilely、Science Direct和Pubmed等數(shù)據(jù)庫收集了103個(gè)抗氧化肽和若干蛋白酶的相關(guān)信息。對(duì)103個(gè)抗氧化肽進(jìn)行N端和C端分析，發(fā)現(xiàn)N端Leu、Gly出現(xiàn)次數(shù)最多，頻率最高達(dá)19.4%，C端Tyr、Leu、Val、Phe出現(xiàn)次數(shù)最多，頻率最高達(dá)13.6%。對(duì)搜索得到的酪蛋白進(jìn)行酶切分析，得到5個(gè)ACE抑制肽。


關(guān)鍵詞：玉米蛋白，超聲，抗氧化性