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clostridium phytofermentans木糖異構(gòu)酶基因的表達及酶學(xué)性質(zhì)研究.doc

  
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編號:88-593056大小:323.24K
分類: 論文>生物/化學(xué)論文

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Clostridium phytofermentans木糖異構(gòu)酶基因的表達及酶學(xué)性質(zhì)研究

9847字 26頁 原創(chuàng)作品,已通過查重系統(tǒng)


摘 要
乙醇作為可再生綠色能源具有很大的利用價值。在生物質(zhì)降解物中,木糖占有相當大的比例。木糖異構(gòu)酶是利用木糖生產(chǎn)乙醇的關(guān)鍵酶,其對提高木糖利用率以及降低乙醇發(fā)酵成本具有重要的作用。
論文利用實驗室已經(jīng)鑒定的重組質(zhì)粒pSE380-xylA轉(zhuǎn)化大腸桿菌JM109,以使目的基因得到表達。SDS-PAGE蛋白質(zhì)分析表明,重組菌株與對照菌株相比,有非常明顯的49 kDa左右的特征蛋白條帶出現(xiàn),表達量比較大,重組蛋白的分子量大小與核酸序列理論推算的蛋白質(zhì)分子量相符,目的片段在大腸桿菌JM109中獲得了表達。SDS-PAGE掃描分析重組酶占總蛋白的21%左右。通過鎳柱親和層析及Sephacral S-300分子篩純化了重組Clostridium phytofermentans木糖異構(gòu)酶,SDS-PAGE電泳結(jié)果表明有非常單一的蛋白條帶出現(xiàn),分子量約為49 kDa;測定了重組酶的酶學(xué)性質(zhì),結(jié)果顯示,純化倍數(shù)達10.9,重組酶的比活力達25.0U/mg。重組酶的最適pH為8.0,最適反應(yīng)溫度為37 ℃。該研究可為以木糖為原料的乙醇生物法生產(chǎn)提供有益參考。


關(guān)鍵詞:乙醇;Clostridium phytofermentans;木糖異構(gòu)酶;表達;酶學(xué)性質(zhì)