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小麥hmw-gs14基因片段的基因槍轉(zhuǎn)化及瞬時表達.rar

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小麥hmw-gs14基因片段的基因槍轉(zhuǎn)化及瞬時表達,9頁8000余字,包含完整論文及答辯ppt摘要: 本實驗利用基因槍法將質(zhì)粒pbi121在不同金粉用量、轟擊距離及轟擊次數(shù)等條件下轉(zhuǎn)化不同基因型小麥幼胚愈傷組織,以gus基因的瞬時表達來建立基因槍轉(zhuǎn)化體系,并利用基因槍法將小麥高分子量麥谷蛋白14亞基基因片段導入小麥幼胚愈傷組織,以期使其整合至小麥基因組并得以穩(wěn)定表達。結(jié)...
編號:30-20669大小:4.79M
分類: 論文>農(nóng)業(yè)林業(yè)論文

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9頁8000余字,包含完整論文及答辯ppt
摘要:

本實驗利用基因槍法將質(zhì)粒pBI121在不同金粉用量、轟擊距離及轟擊次數(shù)等條件下轉(zhuǎn)化不同基因型小麥幼胚愈傷組織,以gus基因的瞬時表達來建立基因槍轉(zhuǎn)化體系,并利用基因槍法將小麥高分子量麥谷蛋白14亞基基因片段導入小麥幼胚愈傷組織,以期使其整合至小麥基因組并得以穩(wěn)定表達。結(jié)果表明,該轉(zhuǎn)化體系中,1350psi,12cm和1100psi,9cm下,gus基因的陽性表達率相差不大;增加轟擊次數(shù),減少轟擊距離并不能顯著的提高gus 瞬時表達的陽性率;而增加金粉用量在一定程度上可提高gus瞬時表達的陽性率。
關鍵詞: 基因槍法 小麥高分子量谷蛋白14亞基基因片段 小麥幼胚愈傷組織 瞬時表達 Gus陽性率 ;


Gene Gun Transformed HMW-GS14 gene Section and Instantaneous Expression
Abstract:
With the gene gun method ,this experiment transformed plasmid PBI121 into the immature embryonic calli of different wheat varieties at the different volumes of gold powder, different distance to bombardment, times of bombardment. Using instantaneous expression of gus to establish transformation system of gene gun method , the wheat HMW -GS14 section was transformed into wheat immature embryonic calli to make it to be recombined and expressed. It shows in this system, there are few difference on gus positive expression rate between the condition of 1350 psi/12cm and 1100psi/9cm;and raising bombardment times or reducing bombardment distances cannot increase the positive rate of gus; however ,raising volumes of gold powder can increase the positive rate of gus.

Key words:
Gene gun transformation ; Wheat HMW-GS 14 gene section; Immature embryonic callus ; Instantaneous expression; Positive rate of gus

前言
小麥作為世界上主要糧食作物之一,提高其產(chǎn)量及改良其品質(zhì)的研究有著重要意義。目前,隨著人們生活水平的不斷提高,小麥的品質(zhì)越來越受到重視。而我國小麥品種由于普遍缺乏5+10亞基等優(yōu)質(zhì)谷蛋白亞基,品質(zhì)明顯比國外品種差。[1,2]為此,國家每年都要花大量外匯進口優(yōu)質(zhì)小麥,以滿足日益增長的人民生活水平的需要。加速品種改良勢在必行。但是,一種植物的品質(zhì)相關性狀一般都是受多基因控制的數(shù)量性狀,并且往往與產(chǎn)量相關,利用常規(guī)雜交育種方法,由于要在缺乏有效選擇手段的條件下對多個基因進行操作,并且還要不影響其產(chǎn)量,其選育難度是可想而知的。利用外源物種的某些關鍵基因雖然為改善這一局面提供了很好的思路,但物種間嚴格的生殖隔離,又常常使這些想法變得可望而不可及?;蚬こ碳夹g(shù)由于在一定程度上可以拓寬植物可利用庫,近年來在植物品質(zhì)育種中較受重視,并取得了一定的初步成果。由于傳統(tǒng)育種技術(shù)存在育種周期長、品質(zhì)改良及增產(chǎn)潛力有限等局限性,因此探索將育種周期短、品質(zhì)改良及增產(chǎn)潛力樂觀的植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)應用于小麥遺傳改良研究便顯得十分必要和迫切。
植物基因工程研究興起于本世紀八十年代中期。隨著生物技術(shù)的飛速發(fā)展,植物分子育種進展迅速。植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)取得了令人矚目的成就。其誕生至今,如何將這項技術(shù)應用于小麥、水稻、玉米等農(nóng)作物的遺傳改良研究便始終是人們努力的重要目標之一。要實現(xiàn)這一目標,首先要
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