磁性α-Fe2O3/β-Fe2O3/SiO2納米復(fù)合材料固定化青霉素?；傅难芯?br>Immobilization of penicillin G acylase on magnetic α-Fe2O3/β-Fe2O3/SiO2 nanocomposites

2萬字 35頁 原創(chuàng)作品，已通過查重系統(tǒng)


摘 要：本文研究磁性α-Fe2O3/β-Fe2O3/SiO2納米復(fù)合材料固定化青霉素G?；傅倪^程及固定化酶的性能。篩選固定化的條件，確定最佳固定條件；通過比較游離酶和固定化酶的適應(yīng)性，得出固定化酶的優(yōu)勢(shì)。
在實(shí)施酶的固定化過程中，考察了戊二醛用量、pH 值、固定化溫度、固定化時(shí)間以及給酶量等條件對(duì)固定化青霉素酰化酶表觀活力、活力回收率等因素的影響。實(shí)驗(yàn)所得最優(yōu)固定化條件為：使用0.2 mL 25%的戊二醛，在pH值為8的緩沖溶液中，酶液用量 0.2 mL，于 37℃下進(jìn)行18 h的固定化反應(yīng)，所制固定化酶的表觀酶活為196.1 U/g，表觀酶活回收率為35%。根據(jù)酶固定化反應(yīng)過程的特點(diǎn)，探索了復(fù)合載體固定化酶的作用機(jī)理。研究結(jié)果表明：復(fù)合載體α-Fe2O3/β-Fe2O3/SiO2表面修飾醛基，通過化學(xué)鍵合（Schiff 反應(yīng)）與物理吸附（酶分子的靜電吸引作用）兩種作用將酶分子快速、高效地固定在載體上，充分地保持了酶分子的構(gòu)象，獲得了較高活性的固定化酶。為了考察所制固定化酶的性能，測(cè)定了游離酶與固定化酶催化反應(yīng)的最適 pH 值、最適溫度、熱穩(wěn)定性、固定化酶的重復(fù)使用情況及米氏常數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：游離酶和固定化酶催化反應(yīng)的最適 pH 值均為 8，最適溫度均為 40℃，但固定化酶的PH和溫度適應(yīng)范圍要比游離酶寬，具有良好的熱穩(wěn)定性，可以重復(fù)利用，重復(fù)使用13次，相對(duì)酶活仍保留約70%。二者的米氏常數(shù)分別為0.506 mol/L和0.02553 mol/L。


關(guān)鍵詞：磁性復(fù)合載體；青霉素?；福晃於?；固定化